CytoFLEX nano Flow Cytometer
CytoFLEX nano — это специализированный проточный цитометр от Beckman Coulter, разработанный для анализа сверхмалых объемов образцов. Он решает ключевую проблему традиционных цитометров, которым для работы требуются миллилитры образца, в то время как во многих современных исследованиях (например, при работе с дорогостоящими реагентами, образцами от педиатрических пациентов или из редких источников) доступны лишь микролитры.
Этот прибор не является сортером (как CytoFLEX SRT), его главная задача — высокочувствительный анализ при минимальном потреблении образца.
Ключевая особенность и преимущество: Работа с малыми объемами
Дорогостоящие клеточные культуры (например, с редактированием генома).
Минимальный объем образца: Для получения репрезентативных данных требуется всего 10–20 мкл образца.
Экономия реагентов: Резко снижает расход дорогостоящих антител и красителей.
«Нулевой» мертвый объем: Система подачи образца и специализированные пробирки (NanoTubes) спроектированы так, чтобы практически не оставалось неиспользованного образца в трубках или игле. Это критически важно, когда каждая капля на счету.
Анализ редких и ценных образцов: Идеален для работы с образцами, где невозможно получить большой объем:
Педиатрия и неонатология: анализ крови новорожденных.
Исследования на мелких животных: мыши, рыбки данио.
Цереброспинальная жидкость (ликвор).
Биопсия тканей (после диссоциации получается небольшое количество клеток).
Технические характеристики и принцип работы:
1. Система подачи образца (NanoSampler)
Это «сердце» прибора, отличающее его от других цитометров.
- Специальные пробирки NanoTubes: Образец загружается в миниатюрные пробирки объемом 65 мкл, которые устанавливаются в держатель.
- Автоматическое перемешивание: Пробирка автоматически вращается для предотвращения осаждения клеток и обеспечения гомогенности суспензии во время анализа.
- Высокоточный пробоотборник: Система точно контролирует объем забора, что позволяет проводить абсолютный подсчет клеток без использования счетных шариков (beads).
2. Оптическая система CytoFLEX
Прибор наследует высококачественную оптику платформы CytoFLEX.
- Конфигурация: Стандартная конфигурация включает 3 лазера (405 нм [фиолетовый], 488 нм [синий], 638 нм [красный]) и 11 детекторов.
- Высокая чувствительность: Использование гибридных ФЭУ обеспечивает отличное отношение сигнал/шум, необходимое для обнаружения слабых сигналов в малых популяциях клеток.
- Согласованность с другими приборами CytoFLEX: Методы, разработанные на больших аналитических цитометрах CytoFLEX, можно легко перенести на nano, и наоборот, благодаря идентичной оптике и ПО.
3. Программное обеспечение — CytExpert
- Интуитивный интерфейс: То же самое ПО, что и для всей линейки, обеспечивает быстрое обучение.
- Функция абсолютного счета (Absolute Count): Программное обеспечение автоматически рассчитывает концентрацию клеток (клеток/мкл) на основе точно отмеренного объема образца. Это избавляет от необходимости использовать контрольные частицы для счета.
Технические характеристики (типовая конфигурация):
- Лазеры: 3 лазера (405 нм, 488 нм, 638 нм)
- Детекторы: 11 флуоресцентных каналов
- Объем образца для анализа: 10–20 мкл (рекомендуемый)
- Минимальный объем загрузки: ~30 мкл (в пробирку NanoTube)
- Скорость потока: Переменная, оптимизирована для малых объемов.
Абсолютный подсчет: Встроенная функция, не требует счетных шариков.
Основные области применения:
Анализ редких клеточных популяций (например, циркулирующих опухолевых клеток после обогащения).
Иммунный мониторинг в клинических исследованиях: Анализ малых объемов крови, взятых у пациентов в ходе клинических испытаний.
Педиатрическая гематология/иммунология.
Исследования на модельных организмах: Анализ образцов от мышей, где частые заборы крови ограничены по объему.
Анализ образцов ликвора и синовиальной жидкости.
Функциональный скрининг антител: Когда каждое антитело производится или тестируется в очень малых масштабах.
Сравнение с традиционными цитометрами:
| Параметр | Традиционный цитометр | CytoFLEX nano |
| Рабочий объем | 100–500 мкл и более | 10–20 мкл |
| Мертвый объем | Высокий (сотни мкл в системе) | Практически нулевой |
| Абсолютный подсчет | Требует добавления счетных шариков | Автоматический, по объему |
| Идеальное применение | Стандартный анализ крови, большие объемы культур | Ценные/редкие образцы, педиатрия, скрининг дорогих реагентов |
Бесплатно скачать брошюру!
Предлагаем бесплатно скачать брошюру с подробным описанием от нашей компании с выгодными предложениями продукции Beckman Coulter Life Sciences.
Конфигурации CytoFLEX nano Flow Cytometer
Конфигурация CytoFLEX nano выбирается в зависимости от сложности решаемых задач. Для базового подсчета и фенотипирования везикул достаточно 2-лазерной конфигурации. Для более глубокого исследования с использованием большего количества маркеров необходимы 3- и 4-лазерные системы, которые обеспечивают максимальную гибкость и многопараметричность для передовых исследований в области биологии наночастиц.
| КОНФИГУРАЦИЯ | Лазеры (Длины волн) | Количество детекторов | Диапазон анализа частиц | Ключевые области применения |
| Базовая (2 лазера) | Фиолетовый (405 нм), Синий (488 нм) | 8 детекторов | ~40 нм — 1.2 мкм | Внеклеточные везикулы (экзосомы, микровезикулы): фенотипирование, подсчет. Бактерии и вирусы: анализ размера и концентрации. Субклеточные частицы |
| Расширенная (3 лазера) | Фиолетовый (405 нм), Синий (488 нм), Красный (638 нм) | 11 детекторов | ~40 нм — 1.2 мкм | Расширенное фенотипирование везикул: больше маркеров одновременно. Анализ липопротеинов: (LDL, HDL). Иммунные комплексы. Наночастицы в биотехе: характеристика синтетических наночастиц |
| Высокопараметрическая (4 лазера) | Ультрафиолетовый (375 нм), Фиолетовый (405 нм), Синий (488 нм), Красный (638 нм) | 13 детекторов | ~40 нм — 1.2 мкм | Самые сложные панели для анализа везикул: максимальное количество маркеров. Использование красителей, возбуждаемых УФ-лазером: например, Hoechst для анализа ДНК в везикулах или бактериях. Передовые исследования в онкологии и нейробиологии |
Ключевые особенности и преимущества для исследований
- Анализ малых объемов: Позволяет работать с образцами, которые невозможно анализировать на обычных цитометрах (например, образцы из органоидов, спинномозговая жидкость, синовиальная жидкость).
- Высокая чувствительность: Оптическая система специально разработана для детекции слабых сигналов от наночастиц.
- Прямой подсчет концентрации: В отличие от исследовательских цитометров, CytoFLEX nano предоставляет точную концентрацию частиц в образце, что является ключевым параметром.
- Интуитивный анализ: ПО позволяет легко отличать флуоресцентно-меченые частицы от фонового шума и проводить их характеристику.
Сводная таблица ключевых характеристик платформы CytoFLEX nano
| Параметр | Значение / Описание |
|---|---|
| Производитель | Beckman Coulter |
| Основное назначение | Анализ малых частиц и образцов малого объема |
| Диапазон измеряемых размеров | ~40 нм — 1.2 мкм (для сравнения: обычный цитометр ~0.5-40 мкм) |
| Объем образца | Всего 10 мкл (минимальный рабочий объем 3-5 мкл) |
| Скорость анализа | Регулируемая, оптимизирована для наночастиц |
| Чувствительность бокового рассеяния (SSC) | Высокая, что критично для детекции наночастиц |
| Система подачи | Капиллярная (Syringe-based), обеспечивающая стабильный поток и отсутствие пузырей |
| Потребление sheath fluid | 0.5 мл в день (очень низкое) |
| Программное обеспечение | CytExpert (то же, что и для других CytoFLEX), с дополнительным Nano Software Module для анализа по стандартам NTA и точного подсчета концентрации. |
| Соответствие | Включает предустановленные протоколы в соответствии с рекомендациями MISEV (Minimal Information for Studies of Extracellular Vesicles) |
