CytoFLEX mosaic Spectral Detection Module
CytoFLEX Mosaic Spectral Detection Module — это инновационная система детекции для проточных цитофлуориметров серии CytoFLEX от компании Beckman Coulter. Это не просто дополнительный детектор, а революционная технология, которая кардинально меняет подход к спектральному потоковому анализу, делая его более гибким, мощным и доступным.
Если говорить просто, этот модуль превращает стандартный цитофлуориметр в высокопроизводительный спектральный анализатор.
Ключевая идея и принцип работы
- От дискретных фотодетекторов к камере: В отличие от традиционных цитометров, где для каждого флуоресцентного канала стоит отдельный фотоумножитель (ФЭУ), система Mosaic использует единственный ПЗС-камеру (CCD) в качестве детектора.
- Дифракционная решетка: Свет от клетки, несущий всю флуоресцентную информацию, не разделяется дихроичными зеркалами, а попадает на дифракционную решетку. Эта решетка действует как призма, раскладывая свет в непрерывный спектр.
- Проецирование «мозаики»: Разложенный спектр проецируется на ПЗС-камеру. Каждая флуоресцентная метка создает на камере свою уникальную «спектральную подпись» — полоску света определенной длины и интенсивности. Вся картина напоминает мозаику, отсюда и название Mosaic.
Математическое «разделение» сигналов: Сложные алгоритмы (в основе которых лежит метод неотрицательных наименьших квадратов — NNLS) анализируют полученный спектральный «отпечаток» для каждой клетки и математически «вычитают» вклад каждой флуоресцентной метки, даже если их спектры сильно перекрываются.
Основные преимущества и характеристики
1. Невероятная гибкость и свобода в выборе флуорохромов
- Больше не нужно беспокоиться о компенсации в реальном времени. Вы можете использовать панели антител с флуорохромами, чьи спектры сильно перекрываются (например, FITC, PE, PE-Cy5, PE-Cy7), и система легко их разделит.
- Легкая перенастройка панелей. Не нужно физически переставлять фильтры или менять конфигурацию детекторов. Все настройки производятся в программном обеспечении.
2. Высокое разрешение и чувствительность
- ПЗС-камера обладает очень высокой квантовой эффективностью, особенно в красном и ближнем инфракрасном диапазонах, что обеспечивает отличное обнаружение тусклых сигналов.
3. Упрощение работы и экономия времени
- Процесс настройки инструмента и компенсации становится значительно проще и быстрее.
- Снижается риск ошибок, связанных с неправильной ручной компенсацией.
4. Масштабируемость
- Модуль Mosaic доступен для разных конфигураций CytoFLEX (S, V, LX), позволяя модернизировать существующие приборы.
5. Идеальное решение для сложных задач
Использование новых флуорохромов: Открывает возможность работы с флуорофорами, которые было сложно использовать в классических системах из-за спектральных перекрытий.
Иммунофенотипирование высоких размерностей: Позволяет создавать панели из 30+ цветов на одном цитофлуориметре.
Иссование редких популяций клеток: Высокая чувствительность помогает точно идентифицировать малые клеточные субпопуляции.
Сравнение с традиционной системой детекции
| Характеристика | Традиционная система (с ФЭУ и фильтрами) | CytoFLEX Mosaic (спектральная) |
| Принцип детекции | Физическое разделение света дихроичными зеркалами и фильтрами | Математическое разделение спектральных «отпечатков» |
| Гибкость | Ограничена набором установленных фильтров | Практически неограниченная, настраивается программно |
| Компенсация | Требует ручной настройки или контроля с использованием контрольных проб | Производится автоматически алгоритмами во время анализа |
| Конфигурация | Фиксированная, изменение требует физической перестройки | Виртуальная, легко меняется под задачи |
Бесплатно скачать брошюру!
Предлагаем бесплатно скачать брошюру с подробным описанием от нашей компании с выгодными предложениями продукции Beckman Coulter Life Sciences.
Конфигурации CytoFLEX mosaic Spectral Detection Module
CytoFLEX mosaic соединяется вручную к анализатору CytoFLEX S или CytoFLEX LX. Существует две возможные конфигурации: CytoFLEX mosaic 88 для CytoFLEX LX (88 каналов обнаружения) и CytoFLEX mosaic63 для 4L CytoFLEX S (63 канала обнаружения. Схема флуоресцентных каналов обнаружения:
U20, V20, B16, Y12, R10, IR3 для CytoFLEX mosaic 88 + CytoFLEX LX UV
U18, V20, B16, Y12, R10, IR3 для CytoFLEX mosaic 88 + CytoFLEX LX NUV
V20, B16, Y12, R10, IR3 для CytoFLEX mosaic 63
SSC на каждом лазере, чтобы расширить возможности ваших исследований с помощью параметров без меток. Отдельное программное обеспечение CytExpert Spectral с минимальными различиями в пользовательском интерфейсе, позволяющее приступить к работе со спектрами в кратчайшие сроки. Доступны два алгоритма для разделения в зависимости от требований пользователя и для подтверждения качества результатов. 10 каналов автофлуоресценции для одновременного отключения автофлуоресценции от нескольких популяций.
| АРТИКУЛ | КОНФИГУРАЦИЯ | КОЛИЧЕСТВО ЛАЗЕРОВ | КОЛ-ВО ФЛУОРЕСЦЕНТНЫХ ДЕТЕКТОРОВ | СОВМЕСТИМОСТЬ |
| D19581 | U-V-B-Y-R-I | 6 | CytoFLEX LX UV | |
| D19582 | U-V-B-Y-R | 5 | CytoFLEX LX UV | |
| D19583 | U-V-B-R | 4 | CytoFLEX LX UV | |
| D19584 | N-V-B-Y-R-I | 6 | CytoFLEX LX NUV | |
| D19585 | N-V-B-Y-R | 5 | CytoFLEX LX NUV | |
| D19586 | V-B-Y-R | 4 | CytoFLEX LX NUV | |
| D19587 | V-B-Y-R | 4 | CytoFLEX S 561 |
| КОНФИГУРАЦИИ | ЛАЗЕРЫ | Спектральный диапазон | Синий (488 нм) | Красный (638 нм) | Фиолетовый (405 нм) | Желто-зеленый (561 нм) |
| Mosaic 2L (V-R) | V — Фиолетовый (405 нм), R — Красный (638 нм) | ~420 нм — ~800 нм | APC, APC-Cy7, APC-R700, Alexa Fluor 647, Alexa Fluor 700, Cy5, Cy5.5 | Brilliant Violet™ (BV421, BV510, BV605, BV650, BV711, BV786), Pacific Blue, AmCyan | ||
| Mosaic 3L (V-R-B) | V — Фиолетовый (405 нм), R — Красный (638 нм), B — Синий (488 нм) | ~420 нм — ~800 нм | FITC, GFP, PE, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PE-Cy7, PerCP, PerCP-Cy5.5 | Все APC-красители и Alexa Fluor с возбуждением от красного лазера | Все Brilliant Violet™ красители | |
| Mosaic 3L (V-Y-R) | V — Фиолетовый (405 нм), Y — Желто-зеленый (561 нм), R — Красный (638 нм) | ~420 нм — ~800 нм | Все APC-красители | Все Brilliant Violet™ красители | PE, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PE-Cy7, PE-Dazzle, PE-CF594 | |
| Mosaic 1L (Гибкая опция) | Можно выбрать любой один лазер (чаще всего V или R) | Зависит от лазера | Зависит от выбранного лазера | Зависит от выбранного лазера | Зависит от выбранного лазера | Зависит от выбранного лазера |
Пояснения и важные примечания
- Гибридная система: Цитометр с Mosaic может работать как в полностью спектральном режиме (если все лазеры подключены к модулю), так и в гибридном режиме. Например, в конфигурации 3L (V-R-B) лазеры 405, 488 и 638 нм работают спектрально, а если в приборе есть дополнительный лазер 561 нм, он может работать в традиционном режиме со своими ФЭУ.
- Программное обеспечение: Все конфигурации управляются ПО CytExpert с программным обеспечением CytExpert for Spectral Research. Компенсация и разделение сигналов производятся автоматически с помощью алгоритмов спектрального разложения.
- Совместимость с платформами: Модуль Mosaic доступен для интеграции в различные модели цитометров линейки CytoFLEX (S, V, LX), что позволяет создавать спектральные системы разного уровня производительности и бюджета.
Краткий итог по выбору конфигурации:
- Для большинства исследований: Выбирайте Mosaic 3L (V-R-B).
- Для максимального качества данных по тандемам PE: Выбирайте Mosaic 3L (V-Y-R).
- Для бюджета и решения конкретных задач: Рассмотрите Mosaic 2L (V-R) или Mosaic 1L.
